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    雙向凝膠電泳及質譜鑒定

    服務簡介

    雙向凝膠電泳是將不同種類的蛋白質按照等電點和分子量差異進行高分辨率分離的分析方法。成功的二維電泳可以將2,000~3,000種蛋白質進行分離,是目前常用且能連續在一塊膠上分離數千種蛋白質的一種方法。通過對蛋白質雙向電泳的圖譜掃描,用相關軟件(ImageMaster等)進行圖譜差異分析,找到差異點;然后把差異點切出,進行脫色、酶解;最后樣品進入質譜測試,得到質譜原始數據文件,通過搜庫可得到差異蛋白質的詳細信息。

    蛋白質質譜鑒定是利用質譜儀進行檢測并結合數據庫檢索的方法實現蛋白定性的一種技術;質譜儀以離子源、質量分析器和離子檢測器為核心。樣品在離子源內電離,產生的各種離子經過質量分析器按其質荷比(m/z)分離,依次被檢測器檢測并記錄下來,采集放大離子信號,經計算機處理,繪制成質譜圖,用檢索軟件選擇相應的數據庫對質譜數據進行分析,從而得到結果。MALDI技術是將樣品與化學基質混合后,點樣于樣品板上,通過激光轟擊,基質吸收能量,將質子轉移到肽段,從而被電離,進入質譜進行掃描。而LC-MSMS通常配合液相,從液相洗脫的多肽分子與溶劑一起噴霧形成帶電液滴,去溶劑化后多肽分子離子化,進入質譜進行掃描。

    技術支持

    電話:027-59304796
    Email:protein2@sangon.com

    主要流程

    蛋白提取
    第一向IEF等電聚焦
    第二向SDS-PAGE
    硝酸銀染色或考馬斯亮藍染色
    圖像分析及數據處理
    選取感興趣的蛋白點進行酶解
    質譜分析

    質譜操作流程:

     

    訂購信息

    項目名稱 內容 服務周期
    雙向凝膠電泳 包括樣品制備和定量、IEF及2D(24 cm)、圖像分析處理 4~8周
    Maldi-tof/tof質譜鑒定 對考染或銀染雙向電泳蛋白點進行檢測 2~3周

    其他蛋白質譜檢測訂購信息

    項目名稱 內容 服務周期
    Maldi-tof/tof質譜鑒定 針對考染或銀染蛋白條帶進行質譜檢測。 2~3周
    LC-MSMS檢測服務 針對考染或銀染蛋白條帶進行質譜檢測,可選30/60/90/120 min。 3~4周

    客戶提供

    提供樣品

    蛋白樣品、組織、細胞、細菌,下載并填寫《雙向電泳服務訂單》 《質譜鑒定服務訂單》

    最終交付

    交付報告

    • 蛋白定量信息一份;
    • 膠圖掃描結果圖片;
    • 圖像分析報告(差異點列表,差異點對應位置圖);
    • 正式實驗報告一份;
    • MALDI-TOF-TOF-MS鑒定報告(成功率、庫信息、蛋白查庫結果等)
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