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    Southern Blot印跡雜交

    服務簡介

    Southern 印跡雜交(Southern blot)是進行DNA 特定序列定位的通用方法。1975 年由英國人Southern 創建,是研究DNA 圖譜的基本技術。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,可按堿基互補的原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。結合凝膠電泳和核酸內切限制酶分析的結果,便可繪制出DNA 分子的限制圖譜。Southern 印跡雜交一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經限制性內切酶消化的DNA 片段,將膠上的DNA 變性并在原位將單鏈DNA 片段轉移至尼龍膜或其他固相支持物上,經干烤或者紫外線照射固定,再與相對應結構的標記探針進行雜交,用放射自顯影或酶反應顯色,從而檢測特定DNA分子的含量。

    技術支持

    電話:021-57072092
    Email:service6@sangon.com

    主要流程

    基因組DNA提取與質檢
    DNA限制酶消化
    電泳分離待測DNA樣品
    電泳凝膠預處理
    轉膜
    探針合成與DIG標記
    預雜
    Southern雜交
    洗膜
    實驗結果圖片掃描

    訂購信息

    服務項目 服務內容 周期
    基因組DNA提取 獲得高純50 μg基因組DNA 1周
    DNA探針設計合成 引物設計、合成及驗證 1-2周
    DIG探針標記 標記一條探針 2個工作日
    Southern Blot檢測 雜交一張膜,每張膜(1-8個樣品) 3-4周
    重復雜交 標記一條探針,雜交已有的膜。 1-2周

    客戶提供

    提供信息

    待雜交目標基因序列和引物序列(公司可以提供引物設計擴增,費用另計)。

    請注明酶切方案,如果項目中需要用到非常規的限制性內切酶,需額外加收酶切費用或有客戶提供相應的限制性內切酶。

    提供樣品

    客戶提供的樣品必須干冰或帶冰袋運送。

    如提供DNA 樣品必須要達到以下條件:

    DNA 完整性好,無降解或RNA 污染,客戶需提供電泳圖;

    DNA 純度高,客戶需提供分光光度檢測OD260/OD280 在1.8 左右;

    勿用TE 溶解DNA,DNA 濃度不低于0.8 μg/μl,雜交需模板DNA 約20 μg/泳道/次;

    長途運輸至乙方,可將檢測合格的DNA溶液編號密封,注意切勿泄漏,低溫快遞。

    最終交付

    交付成品

    剩余模板和引物

    交付報告

    實驗報告(詳細操作步驟,膠片,膠片分析等)

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